Bradford試劑可以用來測定溶液中蛋白質的濃度。該過程基于染料考馬斯亮藍G-250和溶液中的蛋白質形成復合物。蛋白與染料復合物可以使染料的最大吸收光由465nm轉移到595nm。在一定范圍內,光吸收值與蛋白濃度成正比。Bradford試劑不需要稀釋,適合微量、多孔板以及標準分析法。
Bradford 試劑與還原性物質(如巰基乙醇、DTT)兼容性好。還原性物質通常用來穩定溶液中的蛋白質。別的分析方法如(Lowry 和 BCA)與還原性物質兼容不好。因此 Bradford 試劑可用來檢測含有還原性物質的蛋白質樣品。但是,Bradford 試劑只與低濃度的去垢劑兼容。如果要檢測的蛋白質樣品緩沖液中含有去垢劑,建議用 BCA 法測定蛋白質的濃度。
本試劑盒可以檢測的蛋白濃度范圍為100-1500 μg/ml。可以制備BSA的蛋白線性范圍為100-2000 μg/ml 。
本試劑盒從100到1800μg/ml的標準曲線參考圖如下。

操作說明
1,蛋白標準品的配制:
牛血清白蛋白(BSA)標準品的濃度為2mg/ml。對其進行稀釋,制成不同濃度(0,125,250,500,1000,1500,2000μg/ml)的蛋白標準。
2,輕輕混合瓶子中的Bradford試劑,室溫放置。
3,每1倍體積的蛋白質樣品需要混合30倍體積的Bradford工作液。
4,如在試管中進行反應,取50 μl的BSA蛋白標準或者待測樣品,放入標記好的試管中,再每管加入1.5ml Bradford試劑,充分混勻,蓋上蓋子。
5,如需在96孔板中進行反應,則每10 μl的BSA蛋白樣品或者待測樣品,再加入300 μl工作液,充分混勻,蓋上蓋子。
6,室溫放置20 min。將適量反應液加入酶標板或者比色杯中。
7,測定595nm的光吸收。蛋白質與染料形成的復合物在60分鐘穩定。樣品的吸收值必須在60分鐘內測定。測定在10分鐘內完成。
8,制作標準曲線,根據未知樣品的光吸收值計算未知樣品的濃度。
保存條件
Bradford試劑保存于4°C,一年有效。蛋白標準-20℃長期保存。
注意事項
1),為了獲得更準確測定數據,每次分析檢測都要建立標準曲線。
2),如果得到的蛋白濃度不在檢測范圍內,請重新稀釋樣品后再次測定。
3),如果要檢測的蛋白質樣品緩沖液中含有較高濃度去垢劑,建議用BCA法測定蛋白質的濃度。
4),本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
5),為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。